猪瘟病毒抗体检测试剂盒使用说明书

产品信息

产品名称：

通用名：猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）

英文名：Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)

包装规格

96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒

预期用途

猪瘟是由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起的一种高度接触性、出血性和致死性传染病，其症状包括高热、微血管壁变性、广泛出血、坏死、梗塞等现象。本试剂用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，适用于评估猪瘟病毒疫苗的免疫效果。

原理

该试剂盒包含预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂，依托酶联免疫法（ELISA）原理检测猪血清和血浆样本中的猪瘟病毒抗体。实验过程中，经过温育后，样品中的抗体与抗原结合，再通过一系列反应形成颜色反应。显色深浅与样品中的特异性抗体含量直接相关，最终通过酶标仪在450nm波长下测定样品的吸光值。

试剂盒组成

试剂盒包含所有必要的试剂和材料，用于准确检测猪瘟病毒抗体。

储存及有效期

在2～8℃条件下保存，有效期为12个月。开封后的包被板需在2～8℃避光保存，防止潮湿，使用期限为2个月。

适用仪器

适用的仪器包括能够测量450nm和630nm波长的酶标仪，以及37℃恒温设备和可调微量移液器。

样品准备

1. 按照常规方法从动物全血中提取清亮无溶血且无污染的血清，样品在1周内需在2～8℃保存，长期保存需置于-20℃。

2. 使用样品稀释液将待测血清按照40倍稀释，阴性和阳性对照无需稀释。

3. 使用前将浓缩洗涤液恢复至室温并用蒸馏水或去离子水进行20倍稀释，制成工作洗涤液。

检验方法

1. 在使用前将试剂盒置于室温30分钟以恢复至室温。

2. 按需取酶标板条，设定阴阳性对照各2孔，未使用的板条尽快密封并存储在2～8℃。

3. 在阴阳性对照孔中各加入100μl相应对照液体，样品孔中加入100μl稀释后的样品。

4. 混匀后，加盖并置于37℃避光反应30分钟。接下来进行多次洗涤和添加酶标记物，最后加入底物液和终止液，更改为450nm波长下的测定吸光值。

参考值与结果判定

在正常实验情况下，阴性对照的平均OD值应≤0.3，而阳性对照的平均OD值应≥0.6。根据样品OD值及SP值判定结果，SP值≥0.2为阳性，＜0.2为阴性，阴性结果建议补打相应疫苗。

试验方法的局限性

本试验仅作为定性检测，不能完全反映抗体水平的变化。

注意事项

1. 实验操作时需佩戴手套及工作服，并严格执行消毒隔离制度。

2. 终止液具有腐蚀性，避免接触皮肤及衣物，若接触需立即用大量自来水冲洗。

3. 酶标板需完成温度恢复后再开封，未用的酶标板应放入密封袋中保存。

4. 避免混用不同批号的试剂组分。实验结果以酶标仪测定为依据。

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