本试剂盒仅供科学研究使用,严禁用于医学诊断。以下是人CC趋化因子受体1(CCR1)Elisa试剂盒的使用说明及检测原理。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。随后,使用TMB底物进行显色,TMB在过氧化物酶的催化下变为蓝色,并在酸性环境中转化为最终的黄色。颜色深浅与样品中adropin(AD)浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:需使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免任何细胞刺激。收集血液后,进行3000转/分钟离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,并在3000转/分钟离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:进行3000转/分钟离心10分钟,去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合,并捣碎,随后进行3000转/分钟离心10分钟取上清。
5. 保存:若样本采集后未及时检测,请分装成一次用量,并在-20°C冷冻保存,避免反复冻融。在室温下解冻时确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂准备时,20×洗涤缓冲液需以1:20的比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
结果判断
在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,生成线性回归曲线,利用曲线方程计算各样本的浓度值。
免责声明
使用本试剂盒的所有相关操作及结果均需遵循相关规范,尊龙凯时不承担因使用不当引起的任何后果。