### 培养基与微生物分离技术
培养基与微生物分离是从含有多种微生物的样本中获取纯种微生物的关键技术。这项技术主要通过在培养皿上实施,常见的方法包括稀释法和划线法。采用这两种方法的目的在于使单个微生物个体通过繁殖,在固体培养基上形成肉眼可见的群体。通过观察培养特征,使用接种针取出所需的菌种,并在显微镜下进行检查,以确认其为单一形状的微生物。
通常采用的培养基是选择培养基。例如,在分离能够分解纤维素的微生物时,所用的培养基以纤维素为碳源,从而只允许分解纤维素的微生物生长。
在细菌的纯种分离和接种技术中,有几个关键注意事项。首先是稀释度的问题。在进行纯种分离时,需要将菌液稀释至一定的梯度,并将其涂布于如LB培养基等表面。如果稀释不当,可能导致细菌生长过于密集,或是细菌根本不生长。理想的稀释梯度应使平板上的菌落数量保持在30至300之间,此时能够清晰地观察到菌落的形态,便于挑选单个菌落。
在观察菌落时,基本形态与大小可分为以下几种类型:
- 单球菌:如尿素小球菌
- 双球菌:如肺炎双球菌
- 链球菌:如乳酸链球菌
- 四联球菌:如四联球菌,四个细胞排列成田字形
- 八叠球菌:如尿素生孢八叠球菌
- 葡萄球菌:如金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)
此外,还有长宽相差较大的棒杆状或长杆状菌,如枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和梭状杆菌(Bacterium fusiformis)。分枝状或叉状的微生物如双歧杆菌属(Bifidobacterium),竹节状(两端平截)的如炭疽芽孢杆菌(Bacillus anthracis)等。
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