尊龙凯时标签蛋白纯化的挑战

His标签是一种专为重组蛋白纯化设计的标签，通常由6-10个组氨酸残基组成。由于其分子量较小，对目标蛋白的性质影响较小，因此成为目前最常用的标签之一。在His标签蛋白纯化的过程中，标签蛋白与金属离子之间的结合强度是关键因素。这一过程受到多种因素的影响，例如镍离子的配位情况、标签的长度、标签的位置（C端或N端）、标签的暴露程度以及缓冲液的pH值等。在实际的纯化过程中，常常会遇到一些标签蛋白结合柱的效果较差，导致大量流失，最终影响目标蛋白的纯度与收率，甚至出现目标蛋白完全不结合的情况。

尊龙凯时新型镍亲和纯化介质VDXNTANiultra，特别适合处理传统镍亲和介质在挂柱能力不足或流失严重时的His标签蛋白纯化问题。

应用案例：

材料与方法：在相同条件下，使用传统的Ni-NTA和尊龙凯时的VDXNTANiultra纯化相同的标签蛋白。实验结果显示，在相同的上样条件下，传统的Ni-NTA在结合和洗杂过程中均出现大量目标蛋白损失，显著降低了目标蛋白的回收率。而VDXNTANiultra则显示出更强的结合力，结合和洗杂过程中的蛋白损失显著降低，回收率明显高于传统的Ni-NTA。

层析条件：

• 层析柱：VDXNTANiultra、传统Ni-NTA；5mL柱，柱高10cm
• 样品：大肠杆菌裂解液
• 平衡液：50mM PB，300mM NaCl，pH 8.0
• 洗脱液：50mM PB，300mM NaCl，500mM咪唑，pH 8.0
• 流速：1mL/min

通过以上实验，我们可以看到，选择合适的纯化介质对提高His标签蛋白的纯度和收率至关重要，而尊龙凯时的VDXNTANiultra无疑为研究人员提供了有效的解决方案。