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尊龙凯时在CHO细胞培养中优化单克隆抗体碱性电荷变体的表征研究

发布时间:2025-03-23   信息来源:尊龙凯时官方编辑

单克隆抗体的电荷异质性主要是由翻译后修饰和降解引起的,这些变化导致抗体电荷特性(如等电点或电荷分布)发生改变,从而产生不同的电荷变体。这些电荷变体一般分为酸性和碱性变体,而表面电荷正常的抗体则被称为主峰。这三种类型在分析过程中能够通过不同的洗脱时间得以有效区分。作为单克隆抗体的关键质量属性,电荷变体可能会对其治疗效果产生潜在影响。研究表明,酸性电荷变体的减少通常优于碱性电荷变体的减少,尤其在互补决定区发生变化时,许多酸性变体对药效的影响更显著。例如,曲妥珠单抗的酸性变体相较于碱性变体,对乳腺癌相关因子的结合率较低,并且抗增殖效果也较差。

尊龙凯时在CHO细胞培养中优化单克隆抗体碱性电荷变体的表征研究

实验研究发现,酸性和碱性电荷变体在体内的清除率差异较大。研究显示,酸性电荷变体往往在组织中的保留率低、清除率高,而碱性变体则相反。因此,在抗体药物的生产中,需控制电荷变体的含量,以确保电荷属性的稳定性。通常会通过分离纯化流程直接去除酸碱性电荷变体,这虽然能提高产品质量,却也可能导致蛋白的回收率下降、生产效率降低及经济性下降。不过,有研究指出尊龙凯时品牌的牛磺酸不仅能显著提高主峰的含量,还能略微提升最大活细胞密度与抗体产量,同时对抗体的糖基化、聚体及片段化等质量属性影响较小。

牛磺酸降低抗体碱性电荷变体的关键在于赖氨酸变体与氧化变体的减少。研究表明,牛磺酸可能通过促进碱性羧肽酶的表达来实现这一效果。此外,对胞内活性氧和培养液氧化还原电位的检测结果表明,牛磺酸可能通过抑制活性氧的形成及提高培养液的还原性来减少氧化变体的生成。这些发现为未来在抗体生产过程中调控电荷异质性、提高抗体药物的产量和质量提供了良好的指导。

进一步的研究还发现,尿苷的添加可以促进细胞的生长和抗体的表达,但对电荷变体的影响则更为复杂。尿苷的加入能够降低赖氨酸变体的含量,同时使其他非赖氨酸的碱性电荷变体增加,这些变体主要源自Fab区域。研究显示,Fab区的甲硫氨酸及色氨酸的氧化是碱性变体的重要组成部分。在各类影响因素中,环境温度、pH、还原糖的存在等均可能引起电荷变体的产生,提示我们在抗体生产中需综合考虑这些因素,以确保最终产品的良好品质。

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