本文介绍了尊龙凯时的GPCR19激动剂（TGR5 Receptor Agonist）的操作规程，旨在为实验室提供标准化的实验流程以评估细胞增殖和细胞毒性。

实验步骤

1. 在96孔板中，每孔加入100μL细胞悬液。通常，在细胞增殖实验中，每孔可加入2000个细胞，细胞毒性实验中则加入5000至10000个细胞。具体细胞数量应根据细胞的尺寸及增殖速率进行调整。将96孔板放置于37°C、5% CO2的细胞培养箱中培养24小时。

2. 向每孔中加入适当浓度的受试化合物，剂量范围为0至10μL。

3. 将96孔板再次放置于37°C、含5% CO2及100%湿度的细胞培养箱中，孵育预定时间以保证化合物的作用。

4. 使用稀释液将5×MTT稀释至1×MTT溶液。

5. 每孔添加50μL的1×MTT溶液，在37°C下孵育4小时，以使MTT被细胞还原为甲臜。

6. 吸出每孔的上清液，再添加150μL DMSO以溶解产生的甲臜，并在平板摇床上摇匀。

7. 使用酶标仪在570nm波长下测定每孔的光密度。如果没有570nm的滤光片，可以选用560至600nm之间的滤光片。

结果分析

a. 计算细胞存活率：将各个实验孔的OD值减去背景OD值（即培养基加MTT，无细胞）或控制药物孔OD值（即不同稀释度的受试药物加MTT，无细胞），并对每个重复孔的OD值取平均±SD。细胞存活率以T/C%表示，其中T为加药细胞的OD值，C为对照细胞的OD值。细胞存活率的计算公式为：细胞存活率% = (加药细胞OD / 对照细胞OD) × 100%。

b. 求出T/C=50%时的药物浓度（IC50）及T/C=10%时的药物浓度（IC90）。

通过以上步骤和计算方法，可以精确评估尊龙凯时的GPCR19激动剂在细胞体系中的生物活性，促进生物医学研究的进一步发展。