酶联免疫吸附试验（ELISA，Enzyme-Linked Immunosorbent Assay）是一种广泛应用于生物医学领域的免疫检测技术，旨在检测和量化特定蛋白质或其他生物分子。ELISA技术依赖于抗原与抗体之间的特异性结合，通过酶催化作用放大信号，从而实现对目标分子的高灵敏度检测。

一、ELISA样本的处理

进行ELISA检测时，首先需保证检测结果的准确性和可靠性。在实验过程中，必须坚持全面的质量控制，并在收集标本前制定详细的计划以确保数据的有效性。

注意事项

1. 每个样本的收集体积应为100 μl × 检测种类。如果需要进行重复孔测试，样本量应为100 μl × 检测种类 × 2。

2. 如果在一周内进行检测，样本可保存于2-8°C。如果无法及时检测，应将样本分装并冻存于-20°C或-80°C，避免反复冻融。

3. 仔细核对试剂盒的检测范围，以及相关文献以预估样本中待测物的浓度，通过预实验来确认样本的适宜性。

4. 血清样本的采集需避免溶血，因红细胞溶解会释放具有过氧化物酶活性的物质，导致非特异性显色的增加。

5. 为确保尿液检测的准确性，收集尿液标本时应使用清洁干燥的一次性容器，避免因容器不洁造成的污染。尿液样本应尽快检测或妥善保存。

二、标本类型

ELISA常见标本包括：血清、血浆、尿液、细胞上清液及脑脊液等。这些液体标本在检测中具有重要的参考价值，能为生物医学研究提供强有力的数据支持。

标本的保存

通常情况下，5天内可在4°C保存血清标本，存放时间过长可能导致血清IgG聚合，影响实验结果。因此，超过一周的样本应冻结，在使用前彻底混匀，并避免产生气泡。

样本处理流程

1. 血清样本在室温下静置10-20分钟后离心，离心速度应为2000-3000转/分，仔细收集上清，并在保存过程中再次离心以去除沉淀。

2. 对于血浆样本，应选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置，离心过程和血清样本类似。

3. 尿液样本需使用无菌管收集，并在离心后仔细收集上清。

4. 在细胞培养上清中，检测分泌性成分时要用无菌管，并按照要求进行操作，确保结果的准确性。

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