基质胶作为3D细胞培养、类器官、成瘤、侵袭及血管生成等实验的“支架”,在生物医疗研究中具有至关重要的作用。然而,从解冻到铺板,从浓度选择到结果判读,稍有不慎便可能导致实验失败。尊龙凯时结合上万次实验反馈,整理出这份“避坑指南”,助您轻松上手,稳妥获取高质量数据。
存储建议:收到货后,请将本产品置于-20℃环境中存放;若仅短时间使用,可在4℃下保存,不超过7天。建议避免反复冻融;首次解冻后应立即分装(200µL/管),并在-20℃下保存。
融化方法:冷冻状态的基质胶可以在操作前一天放置于碎冰中,再转移至4℃冰箱进行冷藏,次日即可使用。适当延长在4℃下的融化时间,可以有效减少基质胶中的气泡。
类型与特点
含酚红基质胶:适用于常规实验,因酚红的存在,其颜色会在不同温度和pH下发生变化,通常在明黄色至暗红色之间波动。
无酚红基质胶:适用于涉及颜色检测的实验,例如子宫内膜细胞培养,需使用不含酚红的基质胶。要注意,酚红在某些情况下可能干扰实验动物体内激素的自然产生与代谢能力。
标准浓度
标准蛋白浓度:8-12mg/mL,适用于Transwell实验及皮下成瘤实验。高浓度蛋白:18-22mg/mL,适用于凝胶3-5分钟的情况,特别是对于较难成瘤的细胞系,建议将基于低生长因子的标准浓度基质胶进行处理。
常见问题解决方案
皮下成瘤实验:若荷瘤不成功,可能原因包括使用对数生长期的细胞,细胞密度在80-90%左右为宜;应选择4-6周龄的裸鼠,确保小鼠适应性良好。若肿瘤消失,可能与自身炎症反应有关,建议更换免疫缺陷程度更大的小鼠。接种后可在一周内补种一次,以提高成功率。
血管生成实验:若细胞无法形成连续的网格,建议使用3-5代状态良好的HUVEC细胞,融合度维持在70%-80%之间。细胞数量不足将导致无法形成网络,建议每4小时观察一次,以便及时跟踪血管生成情况。
类器官实验:类器官的传代时间因类型不同而异,通常为7-14天,直径在100-200um为适合传代状态。可通过显微镜及H&E染色观察类器官形态,进一步可使用免疫荧光检测类器官是否表达相关生物标志物。若形态与文献不符,可能有多重因素影响,如样本来源和细胞因子品质。
产品信息
尊龙凯时提供多种类型的基质胶,适用于各类实验。
- Ceturegel®Matrix LDEV-Free基质胶(货号40183ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号40184ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix GFR,LDEV-Free基质胶(货号40185ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix GFR,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号40186ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix High Concentration,LDEV-Free基质胶(货号40187ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix High Concentration,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号40188ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix High Concentration,GFR,LDEV-Free基质胶(货号40189ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix hESC-Qualified,LDEV-Free基质胶(货号40190ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free基质胶(货号40191ES,规格15mL/5mL/10mL)
- Ceturegel®Matrix for Organoid culture,Phenol Red-Free,LDEV-Free Plus基质胶(货号40192ES,规格15mL/5mL/10mL)
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