**培养条件**：气相环境为95%空气和5%二氧化碳，温度设定在37℃。人黑色素瘤细胞A875是一种来源于人类皮肤癌的细胞系，广泛应用于肿瘤生物学研究、药物筛选及癌症机制探索。此细胞系经过短串联重复序列（STR）鉴定，以确保其遗传特征的稳定性及细胞株的真实性。

**传代方法**：首次传代建议采用1:2的比例。每两天更换一次培养液，并建议同时购买多种细胞，以享受更多优惠。在细胞到达后，请勿打开培养瓶，以确保其完好无损。请及时核对培养瓶上的细胞名称与您订购的是否一致，并检查瓶身是否有破损或漏液现象。如未发现异常，使用显微镜观察细胞生长情况，并拍摄不同倍数的细胞照片（最好在40x、100x、200x下各拍一张）以备后续参考，前三天的照片是重要的售后依据。如未提供照片，将视为状态良好。

**贴壁细胞传代步骤**：1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS冲洗细胞1-2次；2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1-2ml，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，并观察细胞消化情况。如细胞大部分变圆并脱落，则迅速用培养基终止消化；3. 吸出细胞悬液，并转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清，再加入1-2ml完全培养基进行重悬；4. 按1:2的比例将细胞悬液分瓶传代（两个T25瓶），添加新的完全培养基至每瓶5-8ml，最后置于37℃、5% CO2的细胞培养箱中培养。

**悬浮细胞传代步骤**：1. 采用半换液法处理细胞，竖放培养瓶在培养箱静置1小时，轻轻吸走大约3ml培养基，补加3ml的完全培养基；2. 若进行离心则将细胞悬液收集至离心管中，1000RPM离心5分钟，弃去上清，补加1-2ml培养液进行重悬，再按1:2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml新的完全培养基，以维持细胞活力。

**细胞冻存方法**：1. 当细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时，弃去培养液并用PBS冲洗；2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml，观察细胞变圆后用完全培养液终止消化。再轻轻吹打细胞使其脱落，转移至15ml离心管中，1000RPM离心5分钟；3. 弃去上清，加入1ml雅吉生物无血清冻存液（货号：C7001），混匀后转入冻存管；4. 将冻存细胞放入-80℃冰箱，若后期需转入液氮罐，需在-80℃中保存24小时以上后进行转移。

**细胞复苏方法**：1. 从液氮中取出冻存管，迅速放入37℃水浴中解冻，直至冻存管中无结晶，再用75%酒精擦拭外壁；2. 将细胞转移至含5ml完全培养基的离心管中，1000RPM离心5分钟；3. 弃去上清，重悬并接种至T25培养瓶中，置于37℃、5% CO2条件下培养；4. 隔天更换为新鲜完全培养基继续培养。

**注意事项**：某些细胞在运输过程中可能会出现脱落现象，这是正常情况。如脱落较多，可将培养液收集至离心管，1000RPM离心5分钟，收集上清用于过渡培养，沉淀再重悬并消化后终止反应。所有操作完成后，应按1:2比例进行分瓶传代。

**重发政策**：

若在运输过程中遇到细胞丢失、瓶身破损、培养液漏液等问题，视为重发；如收到的细胞污染，请在收到48小时内提供真实的实验结果以便核实后重发。若细胞复苏后24小时内大部分细胞未存活，需提供照片以进行重发审核。对于生长活性问题，请在收到7天内提供活力鉴定的实验结果，确认后可重发。

**不予重发的情况**包括因客户自身原因造成的细胞污染、操作不当导致细胞状态不佳、非推荐的细胞培养体系所致等。在产品收到2天内未告知状态的问题也不予重发。根据具体情况，将根据合同条款规定进行协商处理。

尊龙凯时致力于提供高质量的细胞株和专业的服务，为生物医学研究提供强有力的支持。