人抗IgE受体抗体ELISA试剂盒专为科学研究而设计,严禁用于医学诊断。本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,在预先包被的adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过适当温育后彻底洗涤。接着,使用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下,TMB变为蓝色,随后在酸性环境中转变为最终的黄色。颜色的深浅与样品中adropin(AD)的浓度呈正相关关系。最后,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
尊龙凯时 ELISA试剂盒组成详见下表:
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释
底物A | 6mL | 3mL | 无
底物B | 6mL | 3mL | 无
终止液 | 6mL | 3mL | 无
封板膜 | 2张 | 2张 | 无
说明书 | 1份 | 1份 | 无
自封袋 | 1个 | 1个 | 无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。本试剂盒应在2-8℃条件下保存,有效期为6个月。
样品收集、处理及保存方法:
1. 血清:使用不含热原与内毒素的试管,避免任何细胞刺激。收集血液后,3000转离心10分钟,迅速小心分离血清与红细胞。
2. 血浆:采用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒与聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水搅拌均匀,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如未及时检测,按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时在室温下完全解冻并确保均匀。
自备物品:
1. 酶标仪(450nm)
2. 精密加样器及枪头:05-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
操作注意事项:
1. 从冷藏环境中取出的试剂盒应在室温下平衡15-30分钟后使用;未用完的酶标板需放回密封袋保存。
2. 洗涤液可能出现结晶,稀释时可加热水以助溶解,洗涤操作不影响结果。
3. 所有加样步骤需使用加样器,定期校对其准确性,以避免实验误差;建议一次加样时间控制在5分钟内,数量较多时推荐使用排枪加样。
4. 每次测定时应同时制作标准曲线,最好重复孔;如果样品中待测物质过高(样本OD值大于标准品第一孔的OD值),请先用稀释液进行稀释,再进行测定,并在计算时乘以总稀释倍数(×n×5)。
5. 封板膜为一次性使用,以避免交叉污染。
6. 需严格按照说明书操作,实验结果应以酶标仪读数为准。
7. 底物需避光保存。
8. 所有样品、洗涤液及废弃物需按传染性物质处理。
9. 不同批次的试剂成分不可混用。
温馨提示:尊龙凯时公司提供代测服务,购买我们的ELISA试剂盒可享受免费的ELISA代测服务,详情请咨询销售经理或在线客服。